Hybridomcellexpansion och subkloningsmedium 杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

产品信息 Produktbeskrivning

产品名称

Produktnamn

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Hybridomcellexpansion och subkloningsmedium

货号 Kat.nr

BRS-MED02

规格

Specifikation

500ml/瓶

500 ml/flaska

产品组分

Komponenter

DMEM基础培养基:80%(体积比)

DMEM Base Medium: 80 % (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Fetalt bovint serum (FBS, importerat): 10 % (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Konditionerat medium: 10 % (v/v)

青霉素:100 单位/ml

Penicillin: 100 U/ml

链霉素:100 单位/ml

Streptomycin: 100 U/ml

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

Andra tillsatser: Encells-proliferationsfaktorer och småmolekylära tillskott

保存条件

Lagringsförhållanden

-20 grader 保存, 有效期 18 个月.

Förvaras vid -20 grader, hållbarhet 18 månader

使用方法

Bruksanvisning

培养基融化:

37 grader 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置3-5min使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Upptining av mediet:

Tina mediet i ett 37 graders vattenbad. Torka av den yttre ytan med 70 % etanol och placera i ett biosäkerhetsskåp för användning.
Obs: Utseendet på en liten mängd vitt flockigt material efter upptining är normalt. Låt mediet stå i 3–5 minuter för att flockarna ska sedimentera, samla sedan upp supernatanten för användning.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等)可直接使用黄枪头轻轻吹打融合孔,细胞计数后按0.8-1.5cell/孔/200ul培养基铺数后按.

Hantera fusionsbrunnar – friska celler:

För fusionsbrunnar med celler i gott skick (t.ex. medelfärg normal eller svagt gul, celler under mikroskop verkar friska, ljusa och normala i storlek), pipettera försiktigt upp och ner med en gul pipettspets. Räkna cellerna och plattan vid 0,8–1,5 celler/brunn i 200 µL medium.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

Hantera fusionsbrunnar – suboptimala celler:

För fusionsbrunnar med celler i suboptimalt tillstånd (t.ex. medium surgjorda/gula eller celler verkar skrumpna, mörka under mikroskop), finns två alternativ tillgängliga för efterföljande subkloning:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml本培养基的24孔板内,在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1,5 celler/孔/200ul培养基),此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

Alternativ 1: Överför celler från fusionsbrunnen till en platta med 24 brunnar som innehåller 1 ml av detta medium. Efter 2–3 dagars expansion, räkna cellerna och utför subkloning med 0,8–1,5 celler/brunn i 200 µL medium. I detta skede är cellfördubblingen begränsad men celltillståndet är bra, vilket gör den idealisk för subkloning.

第2种方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清,每孔补充200ul新鲜的蜬培,兇兇养兇养兇CO2静置培养3-4小时,然后取样细胞计数后进行亚克隆(0,8-1,5cell/孔/200ul培养基);

Ta försiktigt bort supernatanten från fusionsbrunnen med en gul pipettspets och tillsätt 200 µL färskt medium per brunn. Inkubera vid 37 grader, 5 % CO₂ i 3–4 timmar. Prova sedan cellerna, räkna och utför subkloning med 0,8–1,5 celler/brunn i 200 µL medium.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

Obs: Subkloner som odlats med hybridomcellexpansions- och subkloningsmedium når vanligtvis ett stadium som är lämpligt för nedströmsscreening eller analys på dagarna 6–8 efter -subkloning.