-
Telefon
+86-0755 2308 4243
-
Adress
Rum 309, Meihua Building, Taiwan Industrial Park, No.2132 Songbai Road, Bao'an District, Shenzhen, Kina
-
E-post
FAQ
Vilka syntesmetoder använder Biorunstar för peptidsyntes?
RE: Biorunstar har utvecklat olika syntesmetoder för lösningsfas för att möta kundernas krav. Vanligtvis tillämpas fastfas Fmoc-kemi.
Hur skickar man peptider? Vilka QC-data kommer att tillhandahållas?
RE: Alla peptider kommer att skickas av DHL eller FedEx express som i lyofiliserat pulver i individuella välmärkta flaskor, vid rumstemperatur. Med undantag för råpeptider, som endast kommer att kontrolleras med MALDI-MASS-spektrometri, kommer alla syntetiska renade peptider med projektrapport (CoA), MS-data och HPLC-data. datablad kommer att tillhandahållas som innehåller nyckelegenskaperna, såsom peptidsekvens, renhet, kvantitet, modifiering, masspektrumdata och HPLC-data.
Vilken är den typiska omloppstiden för peptidsyntes? Hur lång tid tar det att skicka till mig?
RE: Vår typiska behandlingstid är 2-3 veckor för en standardpeptid under 30 aminosyror. Omläggningstiden varierar beroende på peptidlängd, kvantitet, löslighet och svårighetsgrad. Vanligtvis 3-5 dagar för att nå forskare i andra länder.
Hur länge kan du syntetisera?
RE: Biorunstar har lång erfarenhet av att syntetisera långa peptider, upp till 130aa. Till skillnad från många peptidleverantörer som bara är bekväma med att göra peptider under 30 eller 40aa, har Biorunstar god erfarenhet av att göra peptider från 40aa till 90aa. Det är svårt att syntetisera långa peptider, speciellt 100aa eller längre. Om du planerar att syntetisera en sekvens på 130aa eller längre, vänligen kontakta oss för anpassad proteinexpression och reningsservice.
Vad händer om några problem dyker upp under syntesen eller reningsprocessen?
RE: Varje peptid har sina specifika egenskaper. Om några problem uppstår under syntesen över förväntan och vi inte kan leverera din peptid i tid, kommer vi att informera dig så snart som möjligt. Av en slump att vi inte kan göra peptiden kommer du inte att debiteras för några kostnader.
TFA-saltform, Acetat- eller HCl-saltform: Vilken form ska jag välja?
Som standard syntetiseras peptider i TFA-salt. För cell- eller vävnadsodlingsrelaterade experiment bör du överväga att ha peptider producerade i acetat- eller HCl-saltform i 98 % eller högre för att undvika onormala svar. Acetat- eller HCl-saltform kan beställas mot en extra kostnad.
Vad är hållbarheten för en peptid?
RE: Peptider är stabila i minst ett år om de förvaras lyofiliserade i frys. Om peptider löses upp kan hållbarheten förkortas. Om peptider innehåller flera reaktiva aminosyror som kan oxideras som Trp, Met men speciellt Cys, kan hållbarheten också minska.
Peptiden innehåller flera cysteiner och kan därför lätt bilda disulfidbindningar. Hur undviker jag detta?
RE: Om peptidsekvensen innehåller flera cysteiner, eller andra reaktiva aminosyror, som lätt oxideras, erbjuder Biorunstar att leverera peptiden med spår av den starka reduktanten DTT. Peptiden levereras endast med DTT om detta är specifikt tillåtet av kunden.
Hur lagrar jag mina syntetiska peptider?
RE: De flesta lyofiliserade peptider kommer att vara stabila vid rumstemperatur i 2-3 veckor. För långtidsförvaring bör du lagra frystorkade peptider i -20 grad . Upprepade frys-upptiningscykler bör undvikas. Låt bli rumstemperatur innan du öppnar. Hållbarheten för peptidlösningar är begränsad; en peptidlösning som en gång framställts bör användas så snart som möjligt.
Vad är renheten för den råa peptiden och den avsaltade peptiden? Hur renar man peptiden? Vilka är föroreningarna?
RE: För korta peptider med normala sekvenser under 15aa är det i allmänhet 40-60% enligt HPLC för råkvalitet; 50-70% av HPLC för avsaltad kvalitet. Ju längre peptiden är, desto lägre blir renheten för rå eller avsaltad. Peptider renas i allmänhet genom HPLC med användning av vatten och acetonitrilgradient. De flesta föroreningar är fragment eller deletionspeptider, ofullständigt avskyddade peptider och kvarvarande salt och vatten.
Förklaring av peptidrenhet med HPLC, totalt peptidinnehåll och målpeptidinnehåll.
RE: Biorunstar skickar peptider enligt bruttovikten av det lyofiliserade pulvret. Det lyofiliserade pulvret inkluderar föroreningar såsom fragment eller deletionspeptider, ofullständigt avskyddade peptider, TFA och kvarvarande vatten. Peptidrenhet mäts med HPLC. Det är mängden korrekt peptid i förhållande till alla analyter som absorberar vid ~214 nm (peptidbindningen absorberar), mest sannolikt deletion, trunkering eller ofullständigt avskyddade sekvenser, etc. Peptidens renhet genom HPLC tar inte hänsyn till vatten och salter som vanligtvis finns i provet. Totalt peptidinnehåll är procentandelen av totalt närvarande peptider i förhållande till allt som finns i det lyofiliserade peptidpulvret. Totalt peptidinnehåll bestäms genom kvävehaltsanalys. Målpeptidinnehållet i det lyofiliserade peptidpulvret kan således avslutas med formeln: Totalt peptidinnehåll X Peptidrenhet med HPLC.
Vad är metoden för fluoresceinmärkning?
RE: FITC (Fluorescein isothiocyanat) är den aktiverade prekursorn som används för fluoresceinmärkningen. För den effektiva Nterminala märkningen, en sjuatomig aminohexanoyl
spacer (NH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) sätts in mellan fluoroforen (fluoroscein) och N-terminalen av peptiden. Denna spacer hjälper till att separera fluoroforen från dess fästpunkt, vilket potentiellt minskar interaktionen mellan fluoroforen och biomolekylen till vilken den är konjugerad och gör den mer tillgänglig för sekundära detektionsreagenser.
spacer (NH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH) sätts in mellan fluoroforen (fluoroscein) och N-terminalen av peptiden. Denna spacer hjälper till att separera fluoroforen från dess fästpunkt, vilket potentiellt minskar interaktionen mellan fluoroforen och biomolekylen till vilken den är konjugerad och gör den mer tillgänglig för sekundära detektionsreagenser.
Är C-terminal märkning av Biotin (eller FITC) möjlig?
RE: Ja. C-terminal märkning av biotin (eller FITC) görs genom tillsats av en lysinrest vid C-terminalen av en peptid, och biotin (eller FITC) fästs till lysinsidokedjan via en amidbindning. Lysins positiva laddning tas bort.
Vad är lämplig peptidlängd för antikroppsproduktion?
RE: I allmänhet rekommenderas en 10-25-restpeptid. En längre peptid kan ha fler epitoper, men kan också ha en större chans att bilda stabila sekundära strukturer som inte är naturliga former. En kortare peptid (<10aa) is generally not good unless there are valid reasons for it, such as potential sequence homology with a related family member or other proteins.
Vad är en MAP?
RE: MAPS eller Multi-Antigenic Peptide är en grenad peptid där linjära peptidkedjor är länkade vid sin C-terminal via polylysinkärna, vilket ökar storleken på hela molekylen. Detta görs för att eliminera kopplingen av peptider till KLH. Det verkar dock som om konformationen av peptider på MAP är mindre flexibel, och antikroppar som erhålls med MAP känner typiskt igen målprotein mindre ofta än genom konventionell KLH-konjugering. Dessutom produceras ingen fri peptid när man gör MAPS, vilket gör det svårt att avlägsna polylysinkärnriktade antikroppar. Rening av MAPS med HPLC är svår, och MAPS tillhandahålls utan massverifiering på grund av dess heterogenitet och stora molekylstorlek.
Varför verkar min KLH-konjugerade peptidlösning grumlig?
RE: KLH eller Keyhole Limpet Hemocyanin är ett stort aggregerande protein (MW=4x105 – 1x107). På grund av dess storlek och struktur är dess löslighet i vatten begränsad, vilket orsakar ett grumligt utseende. Detta ska inte påverka immunogeniciteten och den grumliga lösningen kan användas för immuniseringar.
Kan du förklara M+Na- och M+K-masstopparna i MALDI-spektra?
RE: Det är mycket vanligt att se Na (natrium) och K (kalium) addukter i MALDI-spektrat. Natrium och kalium kommer från vattnet som används i peptidlösningsmedlen. Även destillerat och avjoniserat vatten har spårmängder av natrium- och kaliumjoner, som aldrig kan avlägsnas helt. Dessa joniseras under MALDI mass spec-processen och binder till de fria karboxylgrupperna i peptiden. Eftersom det inte finns något vattenreningssystem som tar bort varenda natrium- eller kaliumjon från vatten, är det ibland mycket vanligt och oundvikligt att se natrium- och kaliumaddukter i MALDI-massspecifikationer. Detta är inte en indikation på att peptiden inte är ren, och den bör inte heller förväxlas med en felaktig molekylvikt.